Peter Quill, der noch immer unter dem Verlust von Gamora leidet, schart sein Team um sich, um das Universum zu verteidigen. Die Truppe um Star-Lord, Drax und Groot begibt sich auf eine kosmische Odyssee, die eng mit Rockets Vergangenheit verknüpft ist. Ein Scheitern der Mission könnte das Ende der Guardians bedeuten, das nicht zuletzt im Interesse des künstlich erschaffenen Bösewichts Adam Warlock liegt.